微生物膜是一種高度敏感的生物傳感材料或過濾介質,廣泛應用于微生物檢測、膜生物反應器(MBR)、細胞培養及生物傳感器中。它不僅能夠截留微生物,還能為微生物群落提供附著生長的微環境,實現對生物活性的精準調控。掌握
微生物膜的正確使用方法,是確保實驗成功、數據可靠與系統穩定的核心。

 
  第一步:使用前準備與環境確認
  在潔凈、無菌的環境下操作,避免外源微生物污染。檢查微生物膜包裝是否完好,確認在有效期內。根據用途選擇合適類型:
  檢測用膜:如0.45μm或0.22μm孔徑的醋酸纖維素(CA)或聚醚砜(PES)濾膜,用于水樣中細菌的富集。
  生物載體膜:如聚氨酯泡沫、陶瓷膜或改性纖維膜,用于生物膜反應器中微生物的固定化。
  確保操作臺、鑷子、培養皿等器具已滅菌(高壓蒸汽或紫外線照射)。
  第二步:膜的取出與裝載
  佩戴無菌手套,用無菌鑷子從包裝中取出膜片,嚴禁手指直接接觸膜面。對于過濾應用,將膜小心放置于無菌過濾漏斗或濾器支撐網上,確保膜與密封圈貼合,無褶皺或氣泡。對于生物反應器,按設計要求將載體膜裝入反應槽或模塊中。
  第三步:樣品處理與過濾(適用于檢測膜)
  將待測水樣或溶液通過真空或加壓方式抽濾。控制流速適中,避免過高壓力導致膜破裂或微生物損傷。過濾完成后,用少量無菌緩沖液沖洗濾器內壁,確保微生物全部截留在膜表面。
  第四步:轉移與培養
  過濾后,用無菌鑷子將膜輕輕轉移到預置的固體培養基(如營養瓊脂、m-Endoagar)上,膜與培養基接觸。對于倒置培養法,確保膜面朝上,防止滑動。蓋好培養皿,標記樣品信息。
  第五步:培養條件控制
  將培養皿放入恒溫培養箱,按目標微生物要求設定溫度與時間:
  總大腸菌群:37±1℃,24小時。
  糞大腸菌群:44.5±0.2℃,24小時。
  保持濕度,防止培養基干裂。避免陽光直射,防止非目標菌生長。
  第六步:結果觀察與計數
  培養結束后,觀察膜表面菌落形態、顏色與數量。典型菌落(如金屬光澤、紅色中心)可初步判定。使用菌落計數器進行精確計數,結果以CFU/100mL表示。
  第七步:生物膜反應器中的活化與運行(適用于載體膜)
  新裝載體膜需進行“掛膜”啟動:注入富含營養的污水與接種污泥,在低負荷下連續曝氣7-14天,使微生物在膜表面形成穩定生物膜。運行期間控制溶解氧、pH、溫度與水力停留時間,維持生物活性。
  第八步:使用后處理
  一次性檢測膜使用后應高壓滅菌(121℃,30分鐘)后按醫療廢物處理。可重復使用的載體膜需清洗(反沖洗或化學清洗),去除老化生物膜與污垢,恢復通量。